百检网专业从事阿胶检测,我们平台入驻的检测机构业务覆盖全检测行业。在线一对一服务。检测报告按时按质送到手，坐享报告配送服务。在百检平台上，客户从订购服务到提交委托信息到*后支付检测费用全都可以在线完成,不用出门就可以完成报检流程。接下来为您简单介绍下百检网针对阿胶检测的检测标准及检测流程。

　　检测分类：东阿阿胶、山东阿胶、红枣阿胶、复方阿胶、固胶阿胶、孕妇阿胶、枸杞阿胶

　　检测项目：未知物分析，配方比检测，配方还原，配方改善，配方检测等。(其他检测项目请在线咨询工程师)

　　检测周期：7-15个工作日

　　检测费用：免费初检之后根据客户的检测需求以及实验复杂程度进行报价。

　　样品量大小：具体样品量需要根据客户的检测项目来决定，您可以咨询工程师。

阿胶及含阿胶的食品中动物皮源性成分鉴定方法

1 范围

本标准规定了阿胶及含阿胶的食品中驴皮源性成分、牛皮源性成分、猪皮源性成分、马（骡）皮源性成分的液相色谱-质谱/质谱鉴定方法。

本标准适用于阿胶块、阿胶糕、阿胶膏、阿胶口服液、阿胶浆、阿胶粉、阿胶颗粒等阿胶及含阿胶的食品中动物皮源性成分的鉴定。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其*新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 原理

试样经粉碎后，用1 %碳酸氢铵溶液提取蛋白质，经胰蛋白酶酶解后，采用分子量截留膜过滤获取酶解肽段溶液，液相色谱-质谱/质谱测定皮源性特征肽段。

4 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

4.1 阿胶

马科动物驴Equus asinus L.的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶。

[中华人民共和国药典 2015版 一部，第189页]

5 试剂与材料

除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682规定的一级水。

5.1 试剂

5.1.1 乙腈：色谱纯。

5.1.2 甲酸：色谱纯。

5.1.3 碳酸氢铵：优级纯。

5.1.4 胰蛋白酶：序列分析纯。

5.2 溶液配制

5.2.1 1 %碳酸氢氨溶液：准确称取碳酸氢铵（5.1.3）10.0 g，溶于水并稀释至1 000 mL。

5.2.2 1 mg/mL胰蛋白酶溶液：称取1 mg胰蛋白酶（5.1.4），用1 %碳酸氢铵溶液（5.2.1）1 mL溶解混匀，现用现配。

5.2.3 0.1 %甲酸-水溶液：取甲酸（5.1.2）1 mL，用水稀释至1 000 mL。

5.2.4 0.1 %甲酸-乙腈溶液：取甲酸（5.1.2）1 mL，用乙腈（5.1.1）稀释至1 000 mL。

5.3 对照品、对照标准肽段

5.3.1 对照品：阿胶（对照药材）；新阿胶（对照药材）；黄明胶（对照药材）。

5.3.2 对照标准肽段：牛皮特征肽A，纯度≥94.0 %；马源寡肽A，纯度≥96.0 %。

5.4 对照品、对照标准肽段溶液制备

5.4.1 1 mg/mL对照品溶液：准确称取10 mg试样，用1 %碳酸氢铵溶液超声处理溶解，再用1 %碳酸氢铵溶液定容至10 mL，摇匀。-20 ℃以下避光保存，有效期6个月。

5.4.2 对照标准肽段溶液：

a) 1 mg/mL对照标准肽段储备液：准确量取1 %碳酸氢氨溶液1 mL溶解1 mg对照标准肽段，溶液浓度为1 mg/mL。-20 ℃以下避光保存，有效期6个月；

b) 0.01 mg/mL对照标准肽段工作液：准确移取对照标准肽段储备液（5.4.2.a）100 μL于10 mL容量瓶中，并用1 %碳酸氢氨溶液稀释至刻度，混匀，-20 ℃以下避光保存，有效期3个月。

5.5 质控样品

5.5.1 质控样品：经过确证分析为相应皮源的阳性样品或阴性样品。

5.5.2 报告限添加样品：

a) 驴皮源报告限添加样品：取经确证为阴性的样品基质0.25 g，超声溶于25 mL的1 %碳酸氢铵溶液中，取100 μL阿胶对照品溶液（5.4.1），用上述样品基质溶液定容至1 mL，该样品溶液相当于非阿胶样品基质中含有1 %（w/w）的阿胶，作为驴皮源性的报告限添加样品；

b) 其他皮源报告限添加样品：取经确证为阴性的样品基质0.25 g，超声溶于25 mL的1 %碳酸氢铵溶液中，分别取100 μL新阿胶、黄明胶对照品溶液（5.4.1），5 μL马源寡肽A标准工作液（5.4.2.b），用上述样品基质溶液定容至1 mL，该样品溶液相当于纯阿胶样品基质中掺入1 %（w/w）的新阿胶和黄明胶及50 ng/mL的马源寡肽A，作为猪皮源性、牛皮源性、马（骡）皮源性的报告限添加样品。

5.6 材料

5.6.1 超滤离心管：2 mL，分子量截留值10 kDa。

5.6.2 滤膜：0.22 μm。

6 仪器和设备

6.1 液相色谱-质谱/质谱分析仪：配有电喷雾离子源（ESI）。

6.2 分析天平：感量为0.01 g和0.000 01 g。

6.3 高速粉碎机。

6.4 超声波仪。

6.5 高速冷冻离心机。

6.6 电热恒温水槽。

7 试样的制备与保存

7.1 试样的制备

取出代表性样品，固体样品冷冻后经粉碎机粉碎，用四分法缩分出不少于5.0 g试样；液体、粉状及颗粒样品均分成两份，每份不少于5.0 g，装入清洁容器内，加封后作出标记，一份作试样，一份作留样。

7.2 试样的保存

按照样品产品标签规定的贮藏条件保存，未标明贮藏条件的，常温避光保存。

8 试验步骤

8.1 提取及净化

8.1.1 阿胶

准确称取0.25 g（±0.01 g）试样，用1 %碳酸氢铵溶液超声溶解，再用1 %碳酸氢铵溶液定容至25 mL。

取上述溶液1.0 mL，过0.22 μm滤膜，精密量取200 μL滤液至2 mL超滤离心管滤膜管中，加胰蛋白酶溶液（1 mg/mL）20 μL，混匀，37 ℃恒温酶解16 h，15 000×g，4 ℃离心10 min，收集下层滤液待上机检测。

8.1.2 含阿胶的食品

准确称取2.5 g（±0.1 g）试样，用1 %碳酸氢铵溶液超声溶解，再用1 %碳酸氢铵溶液定容至刻度25 mL。

将上述溶液12 000×g，4 ℃离心10 min，取上清液1.0 mL，过0.22 μm滤膜，精密量取200 μL滤液至2 mL超滤离心管滤膜管中，加胰蛋白酶溶液（1 mg/mL）20 μL，混匀，37 ℃恒温酶解16 h，15 000×g，4 ℃离心10 min，收集下层滤液待上机检测。

8.1.3 对照品及质控样品

对照品及质控样品按照相应基质（8.1.1或8.1.2）进行提取及净化。

8.2 测定

8.2.1 色谱条件

色谱参考条件：

a) 色谱柱：C18色谱柱（50×2.1 mm，1.3 μm），或相当者；

b) 流动相：A: 0.1 %甲酸-水 B: 0.1 %甲酸-乙腈；

c) 流速：0.3 mL/min；

d) 进样量：10 μL；

e) 柱温：30 ℃；

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